本片為迪士尼動畫工作室第64部動畫長片作品，由奧斯卡得獎導演傑瑞布希與拜隆霍華德執導。原班人馬配音除了珍妮佛古德溫（哈茱蒂）、傑森貝特曼（胡尼克）、夏奇拉（志羚姐姐）、伊卓瑞斯艾巴（蠻牛局長）、珍妮史雷（副市長楊咩咩）等角色悉數回歸外，還加入更多新鮮臉孔，包括關繼威（毒蛇蓋瑞）、為個性倔強的法國警官配音的尚雷諾、為猞猁財閥厲家配音的麥考利克金，連歌手紅髮艾德都在片中客串綿羊艾德。而巨石強森也在電影中詮釋一隻多災多難的犬羚。
警官哈茱蒂和胡尼克這次搭檔追蹤一隻神秘爬蟲類的蜿蜒蹤跡。牠的到來，把這座以哺乳類為主的大城市搞得天翻地覆。為了破案，茱蒂與尼克必須到城市裡意想不到的新地點進行臥底，辦案過程處處碰壁，案件影響層面更是盤根錯節，背後是否有更大的藏鏡人在操控一切? 兩人的搭檔關係也面臨前所未有的考驗…
值得一提的是，在《動物方城市》裡，一開始和狐狸胡尼克並肩作戰、做些違法生意的「飛仔」耳廓狐，是由《黑暗騎士》男星湯米李斯特（Tommy Lister Jr.）配音，但他於2020年因心血管疾疾不幸逝世，導演傑瑞布希指出，在獲得李斯特家人的同意下，飛仔將再度活躍於《動物方城市2》，其方法就是使用他為第一部電影配音時未剪進正片的台詞。
